El retablo mayor de la Catedral de Ávila, está documentado su inicio antes de 1499. En este retablo se demuestra que Pedro Berruguete vuelve a tener una reacción italianizante, bien porque la ocasión lo requería o porque el pintor empezó a estar en contacto con otros artistas que practicaban ya las nuevas tendencias.

Este San Ambrosio, Padre y doctor de la iglesia, que está sentado como San Gregorio, San Agustín y San Jerónimo, y lo hace sobre un trono renacentista, evocando a las Artes Liberales, y vestido con una capa fluvial de precioso brocado. El fondo es oro y rojo brillante. La figura transmite cercanía y una sensación de naturalidad.